6.EDTA,枸櫞酸鈉,肝素
【標(biāo)本收集注意事項(xiàng)】
1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管。
2.血清和血漿避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。
3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
4.標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè),需按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-80℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融。
5.可根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)) 。
6.收集標(biāo)本,盡量做到雙份的用量,避免一次實(shí)驗(yàn)失敗,重復(fù)實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本缺失,從而耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
7.收集標(biāo)本時(shí),應(yīng)該做好防護(hù)措施(比如戴手套,口罩,護(hù)目鏡等),認(rèn)為所有標(biāo)本都具有一定的潛在危險(xiǎn)性。
8.樣本處理應(yīng)該在生物安全柜里面,并且正確使用生物安全柜。
【標(biāo)本處理辦法】
1.血清:將采集的全血靜置冰箱4℃過夜,然后1000-3000rpm離心10分鐘,取上清立即測(cè)試,暫時(shí)不測(cè)可以放入-20℃(1-3個(gè)月)或-80℃(3-6個(gè)月)保存。
2.血漿:用EDTA,枸櫞酸鈉,肝素等作為抗凝劑,加入血液混勻后,1000-3000rpm離
心10分鐘,取上清立即測(cè)試,暫時(shí)不測(cè)可以放入-20℃(1-3個(gè)月)或-80℃(3-6個(gè)月)
保存。
3.組織勻漿:切取組織塊,0.01MPBS中過洗一次;按照1G組織加入5-10ml組織蛋白萃取試劑的比例,在冰水中勻漿。勻漿完成后,5000-10000rpm離心10分鐘,取上清立即測(cè)試,暫時(shí)不測(cè)可以放入-20℃(1-3個(gè)月)或-80℃(3-6個(gè)月)保存。
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