單克隆抗體是新一代抗體用于科研、診斷和治療，兔單抗技術(shù)通過用高質(zhì)量兔單抗來替換多抗或低親合力鼠單抗產(chǎn)品，來改進(jìn)難以復(fù)制的診斷產(chǎn)品。
 

　　單克隆抗體的出現(xiàn)帶來了許多好處。首先，兔抗血清通常含有高親合力抗體，可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位。其次，單克隆抗體能夠以識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原。
 

　　單克隆抗體技術(shù)具體過程：
 

　　1、免疫脾細(xì)胞的制備
 

　　制備單克隆抗體的動(dòng)物多采用純系Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。免疫方法同一般血清的制備，也可采用脾內(nèi)直接免疫法。
 

　　2、骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選
 

　　在融合前，骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過含8-AG的培養(yǎng)基篩選，防止細(xì)胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性(恢復(fù)HGPRT的活性的細(xì)胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活)。骨髓瘤細(xì)胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，融合前24h換液一次，使骨髓瘤細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生。
 

　　3、細(xì)胞融合的關(guān)鍵:
 

　　1)、技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。例如，供者淋巴細(xì)胞沒有查到免疫應(yīng)答。這必然要失敗的。
 

　　2)、融合試驗(yàn)最大的失敗原因是污染，融合成功的關(guān)鍵是提供一個(gè)干凈的環(huán)境，以及適宜的無菌操作技術(shù)。
 

　　4、陽性克隆的篩選應(yīng)盡早進(jìn)行
 

　　通常在融合后10天作第一次檢測(cè)，過早容易出現(xiàn)假陽性。檢測(cè)方法應(yīng)靈敏、準(zhǔn)確、而且簡(jiǎn)便快速。具體應(yīng)用的方法應(yīng)根據(jù)抗原的性質(zhì)，以及所需單克隆抗體的功能進(jìn)行選擇。常用的方法有RIA法、ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法，RIA法最準(zhǔn)確。陽性克隆的篩選應(yīng)進(jìn)行多次，均陽性時(shí)才確定為陽性克隆進(jìn)行擴(kuò)增。
 

　　5、克隆化
 

　　克隆化的目的是為了獲得單一細(xì)胞系的群體?？寺』瘧?yīng)盡早進(jìn)行并反復(fù)篩選。這是因?yàn)槌跗诘碾s交瘤細(xì)胞是不穩(wěn)定的，有丟失染色體的傾向。反復(fù)克隆化后可獲得穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株。