人胎盤生長因子(PLGF)elisa試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（elisa）。往預(yù)先包被人胎盤生長因子(PLGF)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胎盤生長因子(PLGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

　　

　　人胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)中遇到的問題解答

　　

　　一、洗板

　　

　　也許因素：

　　

　　1)選用手藝洗板，孔與孔之間液體穿插。

　　

　　2)選用半自動洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，致使洗板不*；洗板針阻塞，抽吸不*；洗板不暢，致使洗板作用差。

　　

　　3)反響板過多形成洗板等待時(shí)刻長。

　　

　　解決辦法：

　　

　　1)確保洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙（挑選潔凈、無或少塵的吸水資料）上輕輕拍干；

　　

　　2)合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。

　　

　　二、顯色

　　

　　ELISA試劑盒也許因素：

　　

　　1)顯色劑制造后放置時(shí)刻過長或運(yùn)用過期顯色劑；

　　

　　2)加顯色劑時(shí)濺起孔外形成液體回流。

　　

　　解決辦法：

　　

　　1)顯色劑盡量在臨用前制造，堅(jiān)持不必過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不必；

　　

　　2)加樣時(shí)堅(jiān)持顯色劑不外流；

　　

　　3)A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。

　　

　　三、停止

　　

　　也許因素如加停止液時(shí)發(fā)生較多氣泡，致使假陽性添加。所以在加停止液時(shí)應(yīng)防止發(fā)生氣泡。

　　

　　四、讀板

　　

　　ELISA試劑盒如讀板時(shí)板底不清洗等。應(yīng)確保酶標(biāo)板清洗。所以在全部操作過程中確保酶標(biāo)板不觸摸次氯酸；盡也許完成ELISA檢查規(guī)范自動化，有用進(jìn)步檢查質(zhì)量。