單克隆抗體技術(shù)的基本原理：要制備單克隆抗體需先獲得能合成專一性抗體的單克隆B淋巴細胞，但這種B淋巴細胞不能在體外生長。而實驗發(fā)現(xiàn)骨髓瘤細胞可在體外生長繁殖，應(yīng)用細胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細胞與免疫的淋巴細胞二者合二為一，得到骨髓瘤細胞。這種細胞繼承兩種親代細胞的特性，單克隆抗體既具有B淋巴細胞合成專一抗體的特性，也有骨髓瘤細胞能在體外培養(yǎng)增殖永存的特性，用這種來源于單個融合細胞培養(yǎng)增殖的細胞群，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體。

 

　　單克隆抗體即把產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與多發(fā)性骨髓瘤細胞進行融合，形成雜交瘤細胞。既有骨髓瘤細胞無限生長的能力，又有B淋巴細胞產(chǎn)生抗體的功能。能在細胞培養(yǎng)中產(chǎn)生大量單一類型的高純度抗體。單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用，是免疫學(xué)中的一次革命，與常規(guī)的多克隆抗體，特異性更強，靈敏度更高，并且便于大規(guī)模重復(fù)生產(chǎn)，*性非常明顯。目前已廣泛應(yīng)用于科研、檢測、醫(yī)藥等各個領(lǐng)域。即把產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與多發(fā)性骨髓瘤細胞進行融合，形成雜交瘤細胞。既有骨髓瘤細胞無限生長的能力，又有B淋巴細胞產(chǎn)生抗體的功能。能在細胞培養(yǎng)中產(chǎn)生大量單一類型的高純度抗體。單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用，是免疫學(xué)中的一次革命，與常規(guī)的多克隆抗體，特異性更強，靈敏度更高，并且便于大規(guī)模重復(fù)生產(chǎn)，*性非常明顯。目前已廣泛應(yīng)用于科研、檢測、醫(yī)藥等各個領(lǐng)域。

 

　　單克隆抗體的使用有著必須遵從的方法，這樣才能達到理想的結(jié)果。

 

　　1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫（大約30分），然后用純水把清洗液配成工作濃度。

 

　　2、取出酶標(biāo)板。每個標(biāo)本需要6孔，陽性對照6孔。多余的用自封袋保存，記得放入干燥劑。

 

　　3、將細胞培養(yǎng)上清50μl加入酶標(biāo)微孔板，每個標(biāo)本加6孔，陽性對照也是加6孔每孔50μl。然后每孔再加入50μl標(biāo)本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。

 

　　4、棄去板內(nèi)液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。再在每個標(biāo)本的6孔中分別加入6種酶標(biāo)二抗各100μl，通用陽性對照的6孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。

 

　　5、吸棄板內(nèi)液體，洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl，換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。

 

　　6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果，看顯色藍的那個孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液（每孔50μl）終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測定波長，630nm參考波長雙波長測定結(jié)果，參看高值孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。陽性對照0D小于0.5實驗無效，需要重做。